01항원 단백질 전달체로서 유산균

표적 항원 단백질 전달체 (Bacterium as a vector), 유산균

• 호스트명

  Lacticaseibacillus paracasei

• 분리원

  경남 마산 깍두기에서 분리한 Lacticaseibacillus paracasei sFT003 & sFT026

• 깍두기에서 분리한 유산균
• GRAS 세균으로 안전성이 입증된 항원전달체
• 유전자 조작이 가능한 wild type (야생형) 균주
• 빠른 증식으로 인한 생산 속도 고도화
• 보편적인 배양법과 단순한 생산공정으로 생산 비용 최소화
• 사균화 공정 후에도 안정적인 균체 형태 유지
• 단위 백신, 분할 백신보다 높은 안전성과 유효성

02항원 단백질 표면발현 앵커 단백질 모티브

표적 항원 융합을 위한 세포벽 표면 앵커 지질단백질 모티브 (Anchor Lipoprotein Motif)

• 앵커 지질단백질명

  세포외막 지질단백질 PrsA

• 분리원

  경남지역 갓김치에서 분리한 Latilactobacillus sakei 유산균의 세포외막

• 갓김치에서 분리한 유산균 세포막 지질단백질
• GRAS 세균에서 발현되는 무독성의 안전성이 입증된 앵커 단백질
• 유산균 세포벽에서 안정적으로 대량 발현되는 외막 단백질
• 세포막 지질과 공유 결합하는 형태의 안정적인 표면 발현
• 항원 전달체 유산균 호스트 내 동일 기능 단백질과의 낮은 아미노산 서열 상동성 (연구 개발의 용이성)
• 세균의 세포 외벽 펩티도글라이칸 층을 가로지르는 단백질 구조

03항원 단백질을 세포외막 표면에 대량 발현 시킬 수 있는 벡터 시스템

유산균 표면발현 표적 단백질 발현계 (Expression system)

• 유산균 유래 벡터 시스템

  pAMß backbone

• 유산균 유래 대량 발현 프로모터 (Promoter)

  Lys-C protease를 활용한 세포외막 단백질 면도 기술로
  Latilactobacillus sakei 세포외막 대량발현 단백질과 그의 Promoter 동정

• 유전자 조작으로 간편하게 표적항원단백질 유전자 교환 (Mock-up 기술)
• 항원유전자 돌연변이에 빠른 대응이 가능한 팬더믹 대응기술
• Trypsin, Lys-C 효소와 nano-LC 결합 MS/MS분석을 이용한 Latilactobacillus sakei 세포외막 대량 발현 단백질 동정 및 그의 생합성 조절 Promoter 확보
• 표적 항원 단백질 전달체 유산균 호스트, Lacticaseibacillus paracasei 에서 세포 외막 안정적 대량 발현 유도
• CBB염색에서 확인 가능한 세포 외막 표면 대량발현 Promoter